1 、左手斜持琼脂平板，皿盖留在桌上，于火焰近处将菌涂于琼脂平板上端，来回划线，涂成薄膜（约占平板总表面积的 1/10 ），划线时接种环与平板表面成 30~40 º角，轻轻接触，以腕力在平板表面行轻快地滑移动作，接种环不应划破培养基表面。

2 、右手持接种环，经火焰灭，待凉后，挑取大肠杆菌（或葡萄球菌）培养物少许。

3 、烧灼接种环，杀灭环上残留菌，待冷（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从薄膜处取菌作连续平行划线，约占平板表面 1/5 左右，再次烧灼接种环，以同样方法作第四次，第五次划线，将平板表面划完。

4 、划线完毕，盖上平皿盖，底面向上，用标签或腊笔注明菌名检验号码，接种者信息等，置 37 ℃孵育培养 24 小时后观察结果。

  这是一种相对简单的划线方法，我们可以在平时的实践当中去应用一下，可以得到很好的结果。

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